滾輪跑步機實驗(rotarod test)是將小鼠或大鼠放在一定高度的滾輪桿上,以強迫跑步的方式,來評估它們的運動能力(motor coordination),耐力(endurance) 及肌肉力量(muscular strength)的實驗方法之一。最早是於 1957 年,由 N. W. Dunham 及 T. S. Miya 所發表的一種實驗方法,用來檢測大小鼠神經功能缺陷。正常小鼠可於轉動的滾輪上維持數分鐘,而有神經功能缺陷或運動能力受損的小鼠,則很快的掉落下來,以此來判別小鼠的運動協調能力或平衡感。滾輪跑步機經過多年來不斷的改良,目前已全面自動化,亦具有定速或加速模式等功能,並可紀錄實驗動物在滾輪上跑步時間及轉速,常見的跑步機型通常一次最多可同時放 5 隻小鼠。
滾輪跑步機實驗可應用於腦部或神經損傷、運動協調性、抗疲勞、神經退化性疾病及藥物效果評估等方面,尤其對於小腦受損所造成的運動障礙評估是更加敏感。一般而言,滾輪跑步機的運動表現,最主要是受到運動協調能力和心肺耐力所影響,但有文獻報導,若將原本常見的滾輪跑步機實驗條件改變,以直徑較粗(約 9 cm)的旋轉桿,配合較低轉速約 10 rpm,每天進行 5 次試驗,連續進行 4 天,則可用來評估小鼠運動方面的學習能力。
初次實驗前的訓練
(1)第一批小鼠放至滾輪跑步機上,靜置數分鐘(視實驗所需,自行設定) (2)以 70%酒精清潔機器,去除糞便、尿液及氣味 (3)每批小鼠重複上述(1)、(2)步驟,直至所有小鼠都進行過此兩步驟 (4)確保小鼠至少休息 10 分鐘以上,再進行步驟(5) (5)第一批小鼠放至滾輪跑步機上,固定轉速 4 rpm,跑 1 分鐘 (6)以 70%酒精清潔機器,去除小鼠糞便、尿液及氣味 (7)每批小鼠重複上述(5)、(6)步驟,直至所有小鼠都訓練完畢 (8)確保小鼠 休息至少 10 分鐘後,再開始正式實驗
每日第一回合之前的訓練
(1)小鼠放至滾輪跑步機上,固定轉速 4 rpm,跑 1 分鐘 (2)以 70%酒精清潔機器,去除糞便、尿液及氣味 (3)每隻小鼠皆重複上述(1)、(2)步驟,並至少休息 10 分鐘以上
(1)滾輪跑步機設定好參數後,以 4 rpm 開始旋轉 (2)第一批小鼠放上滾輪跑步機 (3)按下開始鍵,跑步機速度於 5 分鐘內,由 4 rpm 加速至 30 rpm,接著定速於 30 rpm,再跑 5 分鐘 (4)記錄每隻小鼠從滾輪上掉落的時間 (5)10 分鐘跑步時間結束後,將小鼠放回鼠籠,休息至少 10 分鐘以上 (6)以 70%酒精清潔機器,去除糞便、尿液及氣味 (7)下一批小鼠重複上述(1)-(6)步驟,直至所有小鼠都跑完一次,稱為一回合(trial) (8)每隻小鼠一天跑 3 回合,連續進行 2 天 (9)統整每隻小鼠於滾輪上跑步的平均時間,進行統計分析
滾輪跑步機實驗,小鼠需先加以訓練後,才可開始正式實驗。各種參數的設定,如選擇定速或加速,加速的快慢或範圍,跑步時間的長短,每日實驗次數,連續實驗天數,這些實驗設計,對小鼠來說,都是不同的運動強度,故可依實驗所需,自行設計。小鼠於滾輪跑步機一開始計時的 10 秒內掉落,則須將小鼠抓回輪桿上,繼續進行實驗。每隻小鼠兩次跑步至少需相隔 10 分鐘以上,讓小鼠有充分的休息。實驗統計分析中,若於滾輪上跑步的時間越長,代表其運動表現較佳。
參考資料:
**關鍵字:**rotarod test, behavioral test, motor coordination, 滾輪跑步機, 運動能力, 行為測試, 小鼠
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